实时荧光定量聚合酶链式反应，使用荧光杂交探针，利用荧光信号累积监测PCR的扩增效率，用以精确定量起始模板数，通过内外参对特定DNA序列进行定量分析。

仪器

ABI 7500，通量达 96 个样品。

主要方法

•    SYBR GREEN法：加入SYBR荧光染料，特异性渗入DNA双链，发射荧光信号，从而监测PCR产物的同步增加。

•    Taqman探针法：设计特异性探针，扩增时，Taq酶的外切酶活性将探针酶切降解，使淬灭基团与荧光基团分离，从而监测到报告荧光基团的信号，即实现监测PCR产物增加的效果。

主要用途

•    基因表达（mRNA、miRNA、lncRNA的定量检测）

•    基因分型（TaqMan MGB双探针法）