基于泊松分布原理建立的一种核酸分子绝对定量技术。通过微滴发生器形成上万个微滴，其中每个微滴或不含或含有一个至数个核酸靶标分子。每个单分子进行PCR扩增，探针用于检测特定序列的靶标。随后逐个对每个微滴检测有无荧光信号，最终根据阳性微滴的比例，按照泊松分布的原理，通过软件计算出待检靶分子的拷贝数。

仪器

微滴式数字PCR - BIORAD QX200，可对DNA或RNA分子进行绝对定量分析，适用于 EvaGreen 或探针的数字PCR。

主要用途

•    基因表达：可对细微变化进行检测，准确性高，重复性佳。

•    突变检测：可检测低含量的突变基因，突变序列检测灵敏度高。

•    拷贝数变异CNV检测：可通过精确计量目的基因与参考基因，计算比值得到目的基因的拷贝数。

•    二代测序数据验证：可直接对二代测序数据结果进行绝对定量分析。

应用领域

•    临床应用，肿瘤标志物的检测、肿瘤靶向用药和拷贝数变异分析等

•    环境监控，病原微生物的检测、水样本中微生物的检测等

•    食品检测，转基因动物的检测、转基因植物的检测

主要特点

•    便捷的测定设计，不需要标准曲线

•    可通过增加PCR反应的数量提高精确度

•    可高度耐受PCR反应抑制剂

•    可精确鉴定目标拷贝数，分析微小差异

•    简便而易用的工作流程，一次可以检测 96 个样品

•    灵活的数字 PCR 化学方法，已针对 TaqMan 水解探针和 EvaGreen 测定进行优化