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慢病毒包装

  • 询价
  • 所在地
    上海市闵行区
检测能力
  • 默认
    能力名称:默认
    一级类别:
    二级类别:
    标准名称/编号:/
    限制说明:
    计量单位:
服务周期
  • 1 天
  • 服务周期以订单生效且样品收到后第2个工作日起算
报告类型
  • 普通报告
  • 认可报告
报告形式
  • 电子版
  • 纸质版
报告语言
  • 中文版
报告资质
  • CNAS
  • CMA
仁源生物技术(上海)有限公司
  • 服务简介

    当代基因治疗研究的热门方法是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织,研究靶基因的上调或抑制情况。例如,有些异常基因(癌基因、病毒基因),可通过反义核酸技术引入外源片段将其抑制;有些基因本身有治疗作用,体外合成该基因导入体内使其表达丰度提高。


    病毒载体已成为当前基因治疗载体研究的热点,其优势在于:

    1. 病毒包装技术经历了多年的研究,已趋于成熟,可用于产业化大量生产

    2. 病毒基因组的结构简单、分子背景比较清楚,稳定易于改造、易于制备

    3. 病毒的宿主范围广,且具有高效的靶向特异性

    4. 在目的基因表达方面相对于脂质体介导的效果更明显、长时、稳定

    5. 通过载体改造的方式形成了复制缺陷型结构,安全性高

    慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。作为快速有效的遗传物质投递工具,慢病毒的应用在生物医疗研究领域已广泛流行。


    特点

    1. 区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,常用于感染难转染的细胞,如原代细胞、神经元细胞、干细胞、不分化细胞、心肌细胞、肝细胞、内皮细胞、肿瘤细胞,且效率近100%

    2. 可装载DNA片段容量高达6kb

    3. 目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,形成稳定遗传物质,使得目的基因在细胞中可稳定长期表达。

    4. 病毒载体颗粒通过包装元件和含病毒基因组质粒共转染包装细胞系。利用逆转录机制构建自我失活(SIV)的HIV-1来源的载体,一旦转移到靶细胞后,它就丧失了病毒长末端重复的转录能力,减少了产生重组病毒的机会,并避免了与启动子干扰的问题。


    综上特点决定了其应用

    1. 用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建

    2. 载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,其产生滴度更高,为活体动物模型实验提供高性价比的包含目的基因的病毒液

    3. 其高转导效率及整合到基因组的特点为RNAi和cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利的途径



    慢病毒包装服务流程


    1. 制备DNA/转染试剂复合物

     2.转染工具细胞:通常使用293T细胞

    3. 收获病毒

    4. 去除蛋白等杂质

    5. 检测滴度



    服务提供


    1. 不少于1ml慢病毒包装产物

    2. 滴度不低于108

    3. 提供对照载体

    4. 提供包含实验过程和中间结果的详细技术报告



    注意要点


    1. 包装好的病毒可以根据用户要求感染目的细胞

    2. RNA干扰慢病毒提供三条不同的shRNA序列



    服务周期

        3-6周



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